Foghlaim faoi cholúin chrómatagrafaíochta saotharlainne

Ancolún crómatagrafaíochtaTá an teicníc idirscartha bunaithe ar na comhéifeachtaí deighilte éagsúla idir an chéim sheasta agus an chéim shoghluaiste sa mheascán. Is iondúil gurb é an chéim stáiseanóireachta ná asaire, mar shampla glóthach shilice, alúmana, polaimíd, etc., atá líonta go cothrom sa cholún crómatagrafaíochta. Is é an chéim soghluaiste an tuaslagóir a thugann an meascán isteach sa cholún crómatagrafaíochta, ar a dtugtar an t -eluent freisin. De réir mar a ghluaiseann an chéim shoghluaiste sa cholún crómatagrafaíochta, fanann gach comhpháirt ar an gcéim sheasta le haghaidh ama difriúil mar gheall ar an difríocht idir an chomhéifeacht dheighilte, chun idirscaradh a bhaint amach.

Mar uirlis thábhachtach deighilte, tá ról ríthábhachtach ag colún crómatagrafaíochta saotharlainne i réimsí ceimiceacha, bitheolaíocha, cógaisíochta agus eile. Bunaithe ar phrionsabal na crómatagrafaíochta, is féidir gach comhpháirt sa mheascán a dheighilt go héifeachtach trí dhifríocht na comhéifeachta críochdheighilte, cumas asaithe agus tuaslagthacht na substaintí éagsúla idir an chéim sheasta agus an chéim soghluaiste a úsáid. Tabharfaidh an páipéar seo isteach an bunphrionsabal, an cineál, an modh roghnúcháin, an nós imeachta oibríochta agus an cur i bhfeidhm i réimsí éagsúla den cholún crómatagrafaíochta saotharlainne go mion.

Is féidir colúin chrómatagrafaíochta saotharlainne a roinnt ina go leor cineálacha de réir a bprionsabal gníomhaíochta, ábhair líonta, cruth agus méid.

◆ Aicmiú de réir Prionsabal na Gníomhaíochta

1) Crómatagrafaíocht an cholúin asaithe: Úsáidtear an t -asaitheoir chun an difríocht i gcumas asaithe gach comhpháirt den mheascán a dheighilt. Braitheann an rogha asaithe ar nádúr na substainte atá le scaradh, mar shampla glóthach shilice atá oiriúnach chun comhdhúile neamhpholacha agus polar a dheighilt, agus tá alúmana oiriúnach do chineálacha éagsúla comhdhúile de réir aigéid agus alcaile.

2) Crómatagrafaíocht an cholúin dheighilte: Déantar an meascán a dheighilt de réir na difríochta i gcomhéifeacht dheighilte idir na céimeanna seasta agus na céimeanna soghluaiste. Is iondúil go n -úsáideann crómatagrafaíocht an cholúin dheighilte córas tuaslagóra mar an chéim shoghluaiste agus go n -athraíonn sé an chomhéifeacht dheighilte trí chomhdhéanamh an tuaslagóra a athrú.

3) Crómatagrafaíocht colúin mhalartaithe ian: Tá roisín malartaithe ian scartha le hasú agus scaoileadh na n -ian sa mheascán. Tá grúpaí malartaithe ian ar leith ag roisíní malartaithe ian ar féidir leo ian a mhalartú sa tsubstaint scartha.

◆ Sórtáil trí ábhar a líonadh

1) Colún Glóthach Shilice: Is é atá i nglóthach shilice ná asaitheoir a úsáidtear go coitianta, atá oiriúnach chun éagsúlacht ábhair orgánaigh a dheighilt. Tá cobhsaíocht theirmeach agus cheimiceach den scoth ag colúin silicone agus is féidir iad a úsáid thar raon pH leathan.

2) Colún Alumina: Tá colún alúmana roinnte i gcolún aigéadach, alcaileach agus alúmana neodrach de réir aigéid agus alcaile, atá oiriúnach do chineálacha éagsúla deighilte cumaisc. Tá cumas asaithe láidir ag colún alumina do shubstaintí polar.

3) Colún Polyamide: Tá feidhm ag crómatagrafaíocht asaithe agus de chrómatagrafaíocht dheighilte sa cholún polaimíde, agus tá sé oiriúnach do dheighilt comhdhúile ar féidir leo bannaí hidrigine a dhéanamh le polaimíd, amhail feanóil, aigéid, quinones, etc.

◆ Sórtáil de réir cruth agus méid

1) Colún Gloine: An cineál colún crómatagrafaíochta a úsáidtear go coitianta i saotharlanna, leis na buntáistí a bhaineann le trédhearcacht agus breathnóireacht éasca. Cinntear méid an cholúin ghloine de réir an méid ábhair atá le scaradh agus an méid deacrachta idirscartha, agus is iondúil go mbíonn an cóimheas trastomhas go airde idir 1: 8 agus 1:50.

2) Colún cruach dhosmálta: Tá na buntáistí a bhaineann le friotaíocht creimthe agus friotaíocht brú ag colún cruach dhosmálta, atá oiriúnach do chórais chrómatagrafaíochta ardbhrú. Is annamh a bhíonn úsáid colún cruach dhosmálta, ach tá buntáistí aige i gcoinníollacha áirithe.

Tá sé ríthábhachtach go roghnófaí colún crómatagrafaíochta oiriúnach chun deighilt éifeachtach a bhaint amach. Agus colúin chrómatagrafacha á roghnú, ní mór na tosca seo a leanas a bhreithniú:

Tá raon leathan feidhmchlár ag colúin chrómatagrafaíochta saotharlainne i roinnt réimsí, lena n -áirítear ach gan a bheith teoranta dóibh seo a leanas:

◆ Deighilt agus íonú próitéine agus íonú: Tá colún crómatagrafaíochta ar cheann de na huirlisí tábhachtacha le haghaidh deighilt agus íonú próitéine. De réir na difríochta idir méid próitéine, muirear maoin agus cleamhnas, is féidir modhanna crómatagrafacha éagsúla a roghnú le haghaidh deighilte agus íonú. Mar shampla, tá crómatagrafaíocht colún malartaithe ian oiriúnach do phróitéiní atá scartha le hairíonna muirir; Úsáideann crómatagrafaíocht colún cleamhnaithe airíonna ceangailteacha sonracha chun próitéiní sprice a leithlisiú agus a íonú.

◆ Aigéid núicléasacha a dheighilt: Is féidir colúin chrómatagrafacha a úsáid freisin chun aigéid núicléasacha a dheighilt. Trí mhodhanna sainiúla crómatagrafacha, is féidir móilíní aigéid núicléasaigh faid agus struchtúir éagsúla (mar shampla blúirí DNA agus móilíní RNA) a dheighilt go héifeachtach sa cholún chun freastal ar riachtanais anailíse aigéid núicléasaigh ina dhiaidh sin, seicheamhú agus turgnaimh eile.

◆ Comhdhúile móilíní beaga a dheighilt: Is féidir idirmheánacha drugaí, comhpháirteanna móilíní beaga i dtáirgí nádúrtha, srl. De réir na difríochta idir an chomhéifeacht dheighilte idir an chéim sheasta agus an chéim shoghluaiste, is féidir modh crómatagrafach oiriúnach a roghnú chun comhdhúile móilíní beaga a dheighilt agus a íonú. Mar shampla, tá glóthach shilice chéim droim ar ais oiriúnach chun móilíní beaga lipophilic a dheighilt; Tá an gnáthfhoirmiú shilice oiriúnach chun móilíní beaga hydrophilic a dheighilt.

◆ Deighilt chodánach polaisiúicrídí: Is féidir an colún crómatagrafaíochta a úsáid le haghaidh scaradh codánach polaisiúicrídí. De réir mhéid na móilíní polaisiúicríd agus struchtúr slabhra brainseach, is féidir teicnící crómatagrafacha oiriúnacha a roghnú chun meascáin polaisiúicríd a dheighilt i leibhéil éagsúla, rud atá cabhrach chun staidéar a dhéanamh ar an ngaol idir struchtúr agus feidhm polaisiúicrídí.

◆ Iarratais eile: Úsáidtear colúin chrómatagrafaíochta go forleathan freisin chun táirgí intracellular a dheighilt agus a eastóscadh tar éis briseadh cille, scaradh agus íonú comhpháirteanna gníomhacha i sleachta plandaí, scaradh agus íonú antaibheathach, scaradh agus íonú einsímí, íonú antasubstaintí, agus scaradh agus comhchruinniú víris. Ina theannta sin, tá ról tábhachtach ag an gcolún crómatagrafaíochta freisin maidir le táirgí peitriceimiceacha a dheighilt agus a anailísiú, breiseán bia a dheighilt agus a bhrath, amhábhair chosmaideacha a dheighilt agus a íonú, an anailís aicmithe ar ábhair polaiméire agus scaradh agus íonú spíosraí nádúrtha.