Crómatagrafaíocht an cholúin droim ar ais
2.Cómatagrafaíocht Colún (Cineál Rothlaithe)
3.Cómatagrafaíocht Colún (Lámhleabhar)
*** Liosta praghsanna don iomlán thuas, déan fiosrú orainn a fháil
Cur síos
Paraiméadair theicniúla
Crómatagrafaíocht an cholúin droim ar ais, ar a dtugtar crómatagrafaíocht chéim droim ar ais freisin, is teicníc atá fostaithe go forleathan i gceimic anailíseach agus ullmhúcháin, go háirithe i réimse na bithcheimice agus próitéamaíochta. Baineann an modh seo úsáid as céim ina stad le hairíonna neamhpholacha nó hidreafóbacha, amhail slabhraí alcaile (C8, C18) atá nasctha le glóthach shilice, agus céim soghluaiste atá polar ar dtús, go hiondúil uisce-bhunaithe le mionathraitheoirí orgánacha cosúil le acetonitrile nó meatánól.
Déanann an prionsabal idirscartha insí ar intuaslagthacht dhifreálach na n -anailísí idir na céimeanna soghluaiste agus stáiseanóireachta. De réir mar a éiríonn comhdhéanamh na céime soghluaiste níos orgánaí de réir a chéile, idirghníomhaíonn anailísí a bhfuil hidreafófacht níos airde acu níos láidre leis an gcéim fos, as a leanann truailliú moillithe i gcomparáid le comhdhúile níos polar. Tá an deighilt bunaithe ar chleamhnas an-éifeachtach do mhóilíní a bhfuil polaraíocht éagsúla acu, rud a chiallaíonn go bhfuil sé fíor-riachtanach chun próitéiní, peiptídí agus bithmhóilíní eile a íonú.
Paraiméadair
Iarratais
Bitheolaíocht
Is modh an -éifeachtach é crómatagrafaíocht na céime droim ar ais (RPC) chun meascáin chasta próitéine a dheighilt, mar shampla serum. Giarálann an teicníc nádúr neamh-pholarach na céime ina stad agus nádúr polar na céime soghluaiste chun deighilt a bhaint amach bunaithe ar na hidirghníomhaíochtaí hidreafóbacha idir na próitéiní agus an chéim ina stad.
Eascraíonn ardéifeachtúlacht agus roghnaíocht an RPC as a chumas próitéiní a réiteach le difríochtaí caolchúiseacha ina n -airíonna hidreafóbacha. Fágann sé seo gur rogha iontach é chun próitéiní sonracha a leithlisiú agus a íonú ó shamplaí bitheolaíocha, áit a bhfuil íonacht agus toradh ríthábhachtach.
I gcomhthéacs deighilt serum, is féidir RPC a úsáid chun próitéiní aonair nó codáin próitéine a dheighilt bunaithe ar a ngaol ceangailteach leis an gcéim stáiseanóireachta. Trí chomhdhéanamh agus ráta sreafa na céime soghluaiste a roghnú go cúramach, is féidir le taighdeoirí na coinníollacha idirscartha a chur in oiriúint chun scaradh na bpróitéiní sprice a bharrfheabhsú agus comh-easnamh ábhair shalaithe a íoslaghdú.
Tugann RPC an buntáiste freisin as a bheith inscálaithe, rud a chiallaíonn go bhfuil sé oiriúnach do íonú próitéine ar scála saotharlainne agus próisis táirgthe ar scála níos mó. Ina theannta sin, is féidir colúin RPC a athúsáid agus a athghiniúint go héasca, costais agus dramhaíl a laghdú.
Go hachomair, is uirlis chumhachtach é RPC chun meascáin chasta próitéine a dheighilt, mar shampla serum, agus is rogha iontach é a éifeachtúlacht ard agus a roghnaíocht chun próitéiní sonracha a leithlisiú agus a íonú ó shamplaí bitheolaíocha.
Tionscal Cógaisíochta
Tá ról lárnach ag crómatagrafaíocht na céime droim ar ais (RPC) sa tionscal cógaisíochta, go háirithe maidir le drugaí a dheighilt agus a íonú, lena n -áirítear drugaí agus antaibheathaigh frithsheasmhachta.
Tá íonacht agus cáilíocht na gcógas fíorthábhachtach dá n -éifeachtúlacht agus dá sábháilteacht. Tairgeann RPC modh an -éifeachtach agus roghnach chun drugaí a leithlisiú agus a íonú ó mheascáin chasta, ag cinntiú go gcomhlíonann an táirge deiridh caighdeáin cháilíochta dhiana.
Oibríonn RPC trí úsáid a bhaint as na difríochtaí in idirghníomhaíochtaí hidreafóbacha idir na móilíní drugaí agus an chéim ina stad. Trí chomhdhéanamh agus ráta sreafa na céime soghluaiste a choigeartú, is féidir le taighdeoirí na coinníollacha idirscartha a chur in oiriúint chun íonacht agus toradh an spriocdhrugaí a uasmhéadú agus éilliú a íoslaghdú.
I gcás drugaí agus antaibheathaigh frith -ailse, tá an RPC thar a bheith luachmhar toisc go mbíonn fuinneoga teiripeacha cúnga ag na cógais seo go minic agus go bhfuil siad an -íogair do neamhíonachtaí. Mar gheall ar chumas an RPC leibhéil arda íonachta agus roghnaíochta a bhaint amach, is rogha iontach é chun cáilíocht agus sábháilteacht na gcógas criticiúil seo a chinntiú.
Ina theannta sin, tá RPC comhoiriúnach le raon leathan tuaslagóirí agus céimeanna ina stad, rud a cheadaíonn solúbthacht maidir le coinníollacha idirscartha a bharrfheabhsú do dhrugaí éagsúla. Fágann sé seo gur uirlis ildánach agus iontaofa é RPC le haghaidh íonú drugaí sa tionscal cógaisíochta.
Go hachomair, is teicníc riachtanach é RPC sa tionscal cógaisíochta chun drugaí a dheighilt agus a íonú, lena n -áirítear drugaí agus antaibheathaigh frithsheasmhacha. Tá a chumas chun íonacht agus cáilíocht na míochainí seo a chinntiú ríthábhachtach dá n -éifeachtúlacht agus dá sábháilteacht.
|
|
|
Anailís bia
Is teicníc luachmhar é crómatagrafaíocht na céime droim ar ais (RPC) chun comhdhúile a dheighilt agus a anailísiú le hidreafóbais éagsúla, amhail próitéiní, siúcraí, agus lipidí.
Sa tionscal bia, tá sé ríthábhachtach tuiscint a fháil ar chomhdhéanamh samplaí bia maidir le rialú cáilíochta, lipéadú cothaithe, agus a chinntiú go gcomhlíontar caighdeáin rialála. Soláthraíonn RPC bealach an -éifeachtach chun na comhpháirteanna seo a dheighilt agus a chainníochtú, rud a cheadaíonn anailís chruinn agus iontaofa.
Oibríonn RPC trí leas a bhaint as na difríochtaí in idirghníomhaíochtaí hidreafóbacha idir na hanailísí agus an chéim ina stad. Trí chomhdhéanamh agus ráta sreafa na céime soghluaiste a roghnú go cúramach, is féidir le taighdeoirí na coinníollacha idirscartha a oiriúnú chun deighilt na gcomhdhúl sprice a bharrfheabhsú agus cur isteach ó chomhpháirteanna eile sa sampla a íoslaghdú.
Mar shampla, i gcás próitéiní, siúcraí, agus lipidí, is féidir RPC a úsáid chun na comhdhúile seo a dheighilt agus a chainníochtú bunaithe ar a hidreafófacht choibhneasta. Tá an fhaisnéis seo ríthábhachtach chun measúnú a dhéanamh ar ábhar cothaithe samplaí bia agus chun a chinntiú go bhfuil lipéadú cothaithe cruinn.
Tá an RPC thar a bheith úsáideach freisin chun ábhar salaithe nó adhaltáin a bhrath i samplaí bia. Trí chomhpháirteanna sampla bia a dheighilt agus a anailísiú, is féidir le RPC cabhrú le láithreacht substaintí nach dteastaíonn a aithint, amhail lotnaidicídí, miotail throma, nó breiseáin neamhúdaraithe.
Go hachomair, is uirlis chumhachtach é RPC in anailís bia chun comhdhúile a dheighilt agus a anailísiú le hidreafóbais éagsúla, amhail próitéiní, siúcraí, agus lipidí. Tá a chumas chun faisnéis chruinn agus iontaofa a sholáthar faoi chomhdhéanamh samplaí bia riachtanach chun rialú cáilíochta bia, lipéadú cothaithe, agus a chinntiú go gcomhlíontar caighdeáin rialála.
Ceimic
Crómatagrafaíocht an cholúin droim ar aisIs teicníc ildánach é a fhaigheann iarratais i scaradh comhdhúile ceimiceacha éagsúla, go háirithe iad siúd a bhfuil polaraíocht éagsúla acu.
Oibríonn RPC trí leas a bhaint as na difríochtaí in idirghníomhaíochtaí hidreafóbacha idir na hanailísí agus an chéim ina stad. Fágann sé seo go bhfuil sé thar a bheith éifeachtach chun comhdhúile a dheighilt le polaraíocht dhifriúil, toisc go bhféadfadh difríochtaí suntasacha a bheith mar thoradh ar na difríochtaí seo sa pholaraíocht.
Ceann de na príomhbhuntáistí a bhaineann le RPC ná a chumas chun raon leathan tuaslagóirí agus coinníollacha a láimhseáil. Ligeann an solúbthacht seo do thaighdeoirí na coinníollacha idirscartha do chomhdhúile ceimiceacha éagsúla a bharrfheabhsú, ag cinntiú go bhfuil an deighilt éifeachtach agus éifeachtach.
Mar shampla, is féidir RPC a úsáid chun comhdhúile a dheighilt bunaithe ar a dtuaslagthacht i dtuaslagóirí éagsúla, a meáchan móilíneach, nó a struchtúr ceimiceach. Trí chomhdhéanamh na céime soghluaiste, an ráta sreafa, agus an chéim stáiseanóireachta a roghnú go cúramach, is féidir le taighdeoirí na coinníollacha idirscartha a chur in oiriúint chun deighilt na gcomhdhúl sprice a uasmhéadú agus cur isteach ó chomhpháirteanna eile sa sampla a íoslaghdú.
Tá RPC inoiriúnaithe freisin le húsáid le modhanna braite éagsúla, amhail speictreascópacht UV-Vis, mais-speictriméadracht, nó braite innéacs athraonta. Ligeann sé seo do bhrath íogair agus roghnach na gcomhdhúl sprice a bhrath, fiú ag tiúchan íseal.
Go hachomair, is teicníc ildánach é RPC chun comhdhúile ceimiceacha éagsúla a dheighilt, go háirithe iad siúd a bhfuil polaraíocht éagsúla acu. Mar gheall ar a chumas chun raon leathan tuaslagóirí agus coinníollacha a láimhseáil, in éineacht lena chomhoiriúnacht le modhanna braite éagsúla, is uirlis chumhachtach é le haghaidh idirscarthaí ceimiceacha éagsúla.
Éifeacht roghnú tuaslagóra
Le linnCrómatagrafaíocht an cholúin droim ar ais, is céim ríthábhachtach é roghnú tuaslagóra, a bhfuil tionchar suntasach aige ar éifeachtúlacht idirscartha, ar chruth buaic, ar íogaireacht braite, agus ar shaolré an cholúin chrómatagrafaíochta.
Tionchar ar éifeacht idirscartha
Cineálacha tuaslagóra agus roghnaíocht
Tá airíonna ceimiceacha difriúla ag cineálacha éagsúla tuaslagóirí, a rachaidh i bhfeidhm ar a n -idirghníomhaíocht leis na comhpháirteanna éagsúla sa sampla, rud a athraíonn roghnaíocht an idirscartha. Mar shampla, agus anailís á déanamh ar mheit agus ar phara isiméirí {4 - (cloromethyl) aigéad beansóch agus 3 - (cloromethyl), ní fhéadfaí scaradh iomlán a bhaint amach ar dtús ag baint úsáide as an gcóras acetonitrile. Mar sin féin, tar éis meatánól a chur in ionad acetonitrile, bhí buaic -chruthanna an dá sprioc go maith agus d'fhéadfaí scaradh iomlán a bhaint amach. Léiríonn sé seo gur féidir leis an athrú i gcineál tuaslagóra dul i bhfeidhm go mór ar roghnaíocht an idirscartha. I gcás roinnt comhpháirteanna atá deacair a scaradh, trí chineálacha éagsúla tuaslagóra a thriail, is féidir teacht ar choinníollacha idirscartha níos oiriúnaí.
Neart agus réiteach tuaslagóra
Tagraíonn neart tuaslagóra do chumas tuaslagóra sampla a chur as colún crómatagrafaíochta. Trí dhéine an tuaslagóra a choigeartú, is féidir am coinneála gach comhpháirte sa sampla a athrú, rud a chuireann isteach ar an rún. I gcrómatagrafaíocht chéim droim ar ais, tá déine éagsúla truaillithe ag tuaslagóirí orgánacha a úsáidtear go coitianta amhail meatánól agus acetonitrile. Tá cumas elution acetonitrile beagán níos láidre ná cumas meatánóil. Nuair a bhíonn sé measctha le huisce sa chomhréir chéanna, is féidir leis an sampla a dhíbirt ar bhealach níos éifeachtaí. De réir na cothromóide réitigh, is féidir leis an gcomhéifeacht roghnaíochta a mhéadú an rún R a mhéadú, agus beidh tionchar ag an athrú ar neart tuaslagóra ar an gcomhéifeacht roghnaíochta agus dá bhrí sin beidh tionchar aige ar an éifeacht idirscartha.
Tionchar ar chruth buaic
Déine truaillithe tuaslagóra neamhghnácha agus cruth buaic
Tá tionchar tábhachtach ag déine truaillithe an tuaslagóra shamplaí ar chruth an bhuaic. Nuair a úsáidtear tuaslagóir nó tuaslagán a bhfuil déine truaillithe i bhfad níos airde aige ná an chéim shoghluaiste le haghaidh díscaoilte, is minic a bhíonn fadhbanna ann mar éifeachtúlacht laghdaithe colúin, buaic tosaigh, agus beanna forked ag an mbuaicphointe. Mar shampla, nuair a bhí anailís á déanamh ar Chloramphenicol, ba é an chéim shoghluaiste meatánól: uisce=40: 60. Má dhíscaoileadh clóramphenicol i meatánól, bhí an líon pláta níos lú ná 32, 000 \/m ³. Níos déanaí, baineadh úsáid as an gcéim shoghluaiste le haghaidh díscaoilte, agus d'ardaigh an líon pláta go 90, 000 \/m ³. Tá sé seo toisc go méadaíonn déine elution na céime soghluaiste go háitiúil, rud a chruthaíonn coinneáil neamhréireach idir na codanna tosaigh agus na cúil de chomhpháirt amháin (bogann an chuid tosaigh níos tapúla agus bogann an chuid cúil níos moille), rud a fhágann go mbeidh leathnú réigiúnach agus go dtéann sé i bhfeidhm ar an gcruth buaic.
Comhoiriúnacht idir an tuaslagóir agus an chéim soghluaiste
Is féidir le comhoiriúnacht lag idir an tuaslagóir agus an chéim shoghluaiste cruthanna neamhghnácha neamhghnácha a bheith mar thoradh air. Má tá droch -chomhoiriúnacht ag an tuaslagóir a úsáidtear don tuaslagáit leis an gcéim shoghluaiste, rachaidh sé i bhfeidhm go mór ar aistriú an tuaslagáin idir an tuaslagóir agus an chéim shoghluaiste, agus mar sin beidh tionchar aige ar an bpróiseas asaithe ag an gcéim stáiseanóireachta. Mar shampla, nuair a úsáidtear tuaslagóirí amhail clóraform, aicéatáit eitile, agus beinséin, a bhfuil droch -chomhoiriúnacht acu leis an gcéim shoghluaiste, mar thuaslagóirí samplacha, féadfaidh an tuaslagáit an tuaslagáit a chlúdach go díreach, ag seachaint an phróisis choinneála tosaigh crómatagrafaíochta. Nuair a bhunaítear an chothromaíocht dáilte tuaslagóra, d'fhéadfadh an tuaslagáit a bheith ró -fhairsing nó fiú an colún crómatagrafaíochta a éalú go páirteach, agus mar thoradh air sin tá cruthanna buaic neamhghnácha.
Tionchar ar íogaireacht braite
Ionsú ultraivialait tuaslagóirí
Beidh tionchar ag saintréithe ionsú ultraivialait an tuaslagóra ar íogaireacht an bhrath. Sa réigiún ultraivialait, go háirithe an réigiún ultraivialait i bhfad (gar do 200 nm), tá ionsú acetonitrile i bhfad níos ísle ná an meatánól. Faoi choinníollacha isiméadracha, d'fhéadfadh sé nach mbeadh tionchar na difríochta seo soiléir go fóill. Mar sin féin, má úsáidtear truailliú grádáin, tá an sruth bunlíne de bharr acetonitrile i bhfad níos lú ná an sruth meatánóil. Dá bhrí sin, nuair a úsáidtear acetonitrile mar an chéim shoghluaiste, ní hamháin go bhfuil an crómatagram a eascraíonn as aeistéitiúil taitneamhach ó thaobh aeistéitice de ach tá teorainn braite i bhfad níos ísle aige don sampla. Dá bhrí sin, nuair a bhíonn tonnfhaid níos ísle ná 210nm á n-úsáid acu le haghaidh a bhrath, ba cheart tuaslagóirí a bhfuil tonnfhaid scoite ultraivialait níos ísle acu amhail acetonitrile a roghnú chun torann bunlíne a laghdú agus íogaireacht braite a fheabhsú.
Íonacht an tuaslagóra
Bíonn tionchar ag íonacht an tuaslagóra ar íogaireacht braite freisin. Ba chóir tuaslagóirí grád crómatagrafaíochta a úsáid oiread agus is féidir chun cur isteach na n -eisíontas ar an mbrathadóir a laghdú. D'fhéadfadh eisíontais i dtuaslagóirí íon neamh-chrómatagrafaíochta ionsú a dhéanamh ag an tonnfhad braite, rud a mhéadaíonn torann bunlíne agus íogaireacht braite a laghdú.
Tionchar ar shaolré na gcolún crómatagrafaíochta
Polaraíocht an tuaslagóra
Tá tionchar áirithe ag polaraíocht an tuaslagóra ar shaolré an cholúin chrómatagrafaíochta. Is féidir le substaintí a bhfuil polaraíocht láidir acu, mar shampla meatánól, uisce agus aigéad aicéiteach oighreach, damáiste a dhéanamh do cholúin ghlóthach shilice, agus is féidir le substaintí a bhfuil polaraíocht íseal acu amhail N-butanol agus déchlóraimeatán damáiste a dhéanamh do cholúin ghlóthach shilice atá nasctha go ceimiceach. Is féidir le réitigh alcaileacha damáiste a dhéanamh do mhalartú roisín colúin chrómatagrafaíochta, agus tá seans ann go ndéanfaidh tuaslagáin aigéadacha damáiste do cholúin roisín malartaithe anion. Mar shampla, agus ábhair phacála á n -úsáid acu bunaithe ar ghlóthach shilice, tá sé riachtanach aird a thabhairt ar raon pH na céime soghluaiste. Go ginearálta, is é an raon pH de cholúin C18 idir 2 agus 8. Má tá pH na céime soghluaiste níos lú ná 2, beidh hidrealú na céime bannaithe mar thoradh air. Nuair a bhíonn an luach pH níos mó ná 7, tá an ghlóthach shilice i mbaol díscaoilte. Teastaíonn díghrádú ar an gcéim tuaslagáin mhaoláin a úsáid go minic.
Íonacht agus eisíontais an tuaslagóra
Is féidir na cáithníní neamhíonachta dothuaslagtha atá sa tuaslagóir a choinneáil go héasca ag ceann an cholúin crómatagrafaíochta. Le himeacht ama, is é an toradh a bhíonn air seo ná go mbíonn bacainn mheicniúil ar an gcolún crómatagrafaíochta, rud a fhágann go bhfuil méadú ar bhrú na gcolún agus go mbeidh sé dodhéanta é a úsáid de ghnáth, rud a laghdaíonn saol seirbhíse an cholúin chrómatagrafaíochta. Dá bhrí sin, ba cheart tuaslagóirí grád crómatagrafaíochta a úsáid agus a scagadh sula n-úsáidtear iad.
Clibeanna Te: Crómatagrafaíocht cholún droim ar ais, déantúsóirí crómatagrafaíochta colún droim ar ais na Síne, soláthróirí, monarcha
'Nar par ya
Colún Garda i gCrómatagrafaíochtGlaoigh Linn
