Crómatagrafaíocht cholún traidisiúnta
2.Cómatagrafaíocht Colún (Cineál Rothlaithe)
3.Cómatagrafaíocht Colún (Lámhleabhar)
*** Liosta praghsanna don iomlán thuas, déan fiosrú orainn a fháil
Cur síos
Paraiméadair theicniúla
Crómatagrafaíocht cholún traidisiúntaBaineann sé úsáid as an difríocht i gcóimheasa dáilte substaintí difriúla idir an chéim stáiseanóireachta agus an chéim shoghluaiste, nó cumais choinneála éagsúla na gcéimeanna seasta i gcomparáid le substaintí éagsúla, chun deighilt substaintí a bhaint amach. Nuair a ritheann an meascán tríd an gcolún crómatagrafaíochta leis an gcéim shoghluaiste, idirghníomhaíonn sé leis an gcéim fos sa cholún (mar shampla díscaoileadh, asaithe, etc.). Mar gheall ar na difríochtaí idir airíonna agus struchtúir fhisiceacha agus cheimiceacha gach comhpháirt sa mheascán, bíonn éagsúlacht agus neart a n -idirghníomhaíochtaí leis an gcéim ina stad freisin. Faoin bhfórsa tiomána céanna, tá an t -am coinneála de gach comhpháirt sa chéim ina stad difriúil, ionas go mbeidh na comhpháirteanna sa mheascán ag sreabhadh amach as an gcolún in ord áirithe, ag baint amach deighilte.
Paraiméadar
Brath iarmhar lotnaidicídí
 |
 |
 |
 |
Deirimid go minic é sinCrómatagrafaíocht cholún traidisiúntaIs é atá i gceist le scaradh crómatagrafaíochta colúin i ndáiríre, ar a dtugtar crómatagrafaíocht colúin freisin. Chruthaigh sé agus d'úsáid eolaithe na Rúise é den chéad uair i 1903. Bhrúigh sé tuaslagán de líocha plandaí i bpúdar carbónáit chailciam agus fuair sé bandaí datha éagsúla ar an bpúdar carbónáit cailciam ó bhun go barr. Trí bhanda datha éagsúla a dheighilt agus a bhaint, fuarthas clóraifill réasúnta íon, lutein, etc.
Tar éis céad bliain d'fhorbairt, tá an modh seo sách aibí, agus tá an chéim ina stad tagtha chun cinn freisin ó phúdar carbónáit cailciam amháin go alúmana (ar féidir é a roinnt ina n -aigéadach, neodrach, alcaileach), glóthach shilice, carbón gníomhachtaithe, srl.
De ghnáth ní mór an chéim stáiseanóireachta (glóthach shilice) a íonú agus a ghníomhachtú, agus ba chóir go mbeadh méid na gcáithníní aonfhoirmeach. Go teoiriciúil, is ea is lú méid na gcáithníní agus an t -achar dromchla is mó in aghaidh an mhais aonaid, dá airde an toilleadh asaithe agus is amhlaidh is fearr an éifeacht idirscartha.
Mar sin féin, in úsáid phraiticiúil, nuair a bhíonn na cáithníní céime seasta ró -bheag, is minic a bhíonn dhá chás ann: ceann amháin is ea go bhfuil siad níos éadroime i meáchan agus go mbíonn siad ag snámh go héasca san aer (ní féidir leis an gcorp daonna, agus an míne, an glóthach shilice a dhíghrádú; Ar an dara dul síos, is féidir le cáithníní beaga bearnaí beaga idir cáithníní a bheith mar thoradh orthu freisin, agus mar thoradh air sin tá ráta sreafa tuaslagóra mall agus tomhaltas ama; Ag tabhairt silicone mar shampla, is é an méid is mó a úsáidtear ar bhonn tráchtála de silicone faoi láthair ná mogalra 200-300.
Maidir le modhanna rite colúin, chomh maith leis an trealamh anailíse uathoibríoch amhail ullmhúchán ar aghaidh, ullmhúchán éifeachtach céim leachta, agus meaisíní rite colúin a luaitear níos luaithe, tá an colún láimhe a rithtear go príomha i dtrí chineál: colún brú atmaisféarach a rith, colúin dúlagar a rith, agus pas a rith.
Ina measc, is é an toradh a bhíonn ar an dúlagar tríd an gcolún ná droch -éifeachtúlacht asaithe mar gheall ar ráta sreafa tapa an eluent, as a dtagann caillteanas an chuid is mó de líon na tráidirí agus droch -éifeachtúlacht idirscartha. Tá sé oiriúnach chun samplaí a dheighilt le plátaí TLC sách oscailte, go háirithe i gcás samplaí nach bhfuil ach aon eisíontas mór polar amháin acu sa táirge; Caitear an chuid is mó dá chuid ama ar réamhchóireáil comhdhúile, ag baint roinnt eisíontas roimh íonú cúramach. Ba chóir a thabhairt faoi deara gur féidir le galú tuaslagóra de bharr brú diúltach le linn úsáide a bheith mar thoradh ar chomhdhlúthú líon mór braoiníní uisce ar dhromchla seachtrach an cholúin. Níor chóir iarracht a dhéanamh go héasca ar chomhdhúile íogaire uisce.
Is é an colún brú atmaisféarach an modh idirscartha is éifeachtaí i measc na dtrí, ach toisc go mbogann an tuaslagóir go minic ró -mhall, is féidir le fiú an éifeacht idirscartha is fearr dul i bhfeidhm ar éifeachtúlacht. Dá bhrí sin, is iondúil go gcuirtear brú i bhfeidhm ag an am seo, ar a dtugtar colún faoi bhrú; Ach níor chóir go mbeadh an brú ró -ard. Go ginearálta, úsáidtear liathróid slabhra dúbailte le haghaidh oibriú láimhe, agus úsáidtear caidéal éisc le haghaidh oibriú uathoibríoch. Is féidir an dá cheann a mhodhnú mar a thaispeántar sa phictiúr.
Próiseas trasnaithe traidisiúnta colún:
Ba chóir obair ullmhúcháin a dhéanamh go maith:
Agus colún á roghnú agat, breathnaigh an bhfuil bord sanding ann. I gcás colúin gan boird sanding, cuimhnigh an bun a líonadh le roinnt cadáis. Níor chóir go mbeadh an cadás ró -tiubh nó ró -tanaí, chomh fada agus is féidir leis an silicone a chosc ó theacht as. .
Ullmhaigh an t -íos -pholaraíocht, an lampa UV (a mholtar do phearsanra saotharlainne, láimhe, réidh le grianghraf a thógáil ag am ar bith), trealamh brú, agus raca feadán a thástáil de réir mar is gá!
Roghnaigh colún oiriúnach, cuir glóthach silicone leis, soak an fhoirmiú silicone, agus é a mhaolú
RoghnúCrómatagrafaíocht cholún traidisiúntatá sé an -tábhachtach, agus ba chóir a méid a ríomh bunaithe ar mhéid an táirge, ar féidir é a roinnt go ginearálta:
Cúpla milleagram colúin (an rogha deiridh le haghaidh sintéise iomlán);
Colún de dheich de mhilleagraim (foshraith leathnaithe modheolaíochta);
500 milleagram go 1 ghram de cholún (ag baint úsáide as modheolaíocht mar amhábhar);
Colúin thart ar 5g agus scálaí níos mó.
Is iondúil go mbíonn an cóimheas is coitianta idir trastomhas na gcolún agus airde sa tsaotharlann idir 1: 2.5 agus 1:15. Is é an méid glóthach shilice a úsáidtear mar chéim ina stad le linn luchtú an tsampla ná thart ar 20 go 40 uair níos mó ná an sampla. Ba chóir an caighdeán chun colúin a roghnú a bheith bunaithe ar staid dreapadóireachta pláta TLC de do shampla. Má tá go leor eisíontas gar dá chéile, déan iarracht colún níos mó a roghnú a oiread agus is féidir, ionas gur féidir do shampla a chlúdach le ciseal beag tanaí (tiús molta faoi bhun 5mm). Má tá na heisíontais i bhfad i gcéin, is féidir an tiús seo a mhéadú go nádúrtha, ach ní mholtar go sáródh tiús do shamplaí 2cm, mura nitítear an táirge go simplí.
Déanann a lán daoine botún ag smaoineamh go gcuireann níos mó silicone leis, fiú má tá sé níos tibhe ar mo shampla, an féidir é a dheighilt go maith? Tá an freagra seo diúltach!
Is é an chúis atá leis ná nár shíl na daoine seo riamh nach raibh na samplaí thíos agus os a chionn ag rith ar an líne chéanna, ionas nach bhféadfaidís ach roinnt cinn íon a fháil, a crosaíodh an chuid is mó díobh, gan trácht ar na cinn neamhghnácha, am a chaitheamh agus tuaslagóirí!
Sin an fáth a dteastaíonn tanú ón sampla!
Tar éis an colún a roghnú, is féidir silicone a chur leis trí thonnadóir beathaithe. Ag an am céanna, bí cinnte go gcaitheann tú masc agus go n -oibreoidh tú i gcochall múiche. Ní dhéanfaidh an blagaire (silicosis) an chúis leis seo a mhíniú.
Maidir le insíothlú glóthach shilice, is é an próiseas molta ná: ar dtús, cuir an colún glóthach shilice leis an ghlóthach shilice suiteáilte go hingearach, cuir dromchla an ghlóthach shilice le do lámh, ceangail bun an cholúin glóthach shilice le caidéal uisce, caidéil amach an ghlóthach shilice, agus cuir isteach an t -uaigneas a bhaineann le piolar ó thuas. Nuair a bhíonn an t-uafás ar tí sceitheadh amach, dún an comhla stoptha chun tuaslagóir a chosc ó phumpáil isteach sa chaidéal uisce.
Ansin, faoi bhrú, is féidir an ghlóthach silicone a bheith sáithithe go haonfhoirmeach trí sheacht nó ocht méid colúin a shruthlú leis an méid is lú de ghníomhaire forbartha.
Sampla thuas
Tá sampláil roinnte i sampláil fhliuch agus i sampláil thirim.
(1) Sampláil fhliuch.
Is é an modh a mholtar pípéad a úsáid le barr rubair chun an sampla a tharraingt, gar don chuid uachtarach den ghlóthach silicone, go mall agus go cothrom an sampla go dtí go gclúdaíonn sé ciseal, ansin stop an sampla a chur leis agus roinnt brú a chur i bhfeidhm chun an tsubstaint olach a thumadh isteach sa chiseal glóthach silicone; Déan an tsubstaint olach a thumadh isteach sa chiseal silicone agus déan an próiseas seo arís agus arís eile go dtí go mbeidh na samplaí go léir luchtaithe!
D'fhéadfadh roinnt mac léinn nua a bheith aisteach cén fáth a ndéantar an oibríocht seo in ionad an próiseas fliuch a chumhdach mar shubstaint ar fad ag an am céanna?
Go deimhin, is féidir leis an oibríocht seo airde éifeachtach an chiseal samplach a laghdú. Ag an bpointe seo, tá tús curtha cheana féin le crómatagrafaíocht na gcolún, agus tá na samplaí ina dhiaidh sin cosúil le tuaslagóirí ag brú na samplaí roimhe seo chun asa a dhéanamh agus a dhíspreagadh i nglóthach shilice.
(2) maidir le sampláil thirim.
Mura bhfuil sé fíor -riachtanach, ní mholtar é. Moltar níos mó samplaí soladacha a bhualadh nó a chriostalú. "Moltar modhanna neamhscrupallacha, aicéatáit eitile vs uisce, ascalaithe ultrasonach le hola fiuchta ard" agus "modh athchriostalaithe saotharlainne a roinnt".
De ghnáth bíonn dhá fhadhb ag sampláil thirim; Ar thaobh amháin, le linn an phróisis mheasctha shamplaí, méadaíonn an fhéidearthacht imoibriú idir an sampla agus an ghlóthach shilice mar gheall ar an ngá atá leis an teocht a ardú le haghaidh galú rothlach; Ar an láimh eile, ciallaíonn luchtú tirim go dtabharfar isteach asaitheoirí isteach sa chiseal samplach, ag méadú airde an chiseal samplach nó ar mhéid an cholúin, a éilíonn níos mó ama agus níos mó tuaslagóra.
Mura bhfuil aon rogha eile ann, doirt an púdar asaithe go mall isteach sa cholún le haghaidh luchtaithe, le roinnt riachtanas cosúil le modhanna fliucha.
Cuir sulfáit sóidiam ainhidriúil nó gaineamh Grianchloch leis
D'fhonn tionchar a bheith aige ar an gciseal samplach le linn an t -uafás a chur leis, rud a chruthaíonn míchompord, dífhoirmiúchán, agus tionchar a imirt ar éifeachtúlacht idirscartha, leagtar sraith de shulfáit sóidiam ainhidriúil nó gaineamh Grianchloch go ginearálta ar bharr an tsraith shamplaí.
Is fearr lenár n -innealtóirí sulfáit sóidiam ainhidriúil a leagan go pearsanta toisc go bhfuil feidhm triomaithe aige freisin agus go bhfuil sé cairdiúil le tuaslagóirí ar nós déchlóraimeatán, a bhfuil seans maith ann go n -aistreofaí, ionsú teasa, agus comhdhlúthú!
Elution, sampláil agus bailiú grádáin
Tar éis é a luchtú, sruthlaigh an colún ar dtús le tuaslagóir beag Polar (tuaslagóir nach gceadóidh don táirge dul tríd) le haghaidh méideanna 2-3 colún (sainmhínítear toirt colúin amháin mar thoirt na céime soghluaiste ag sileadh isteach agus amach) chun aonfhoirmeacht a chinntiú, agus ansin roghnaíonn siad comhréir le haghaidh eling.
Conas an t -uafás a roghnú a théann tríd an gcolún?
Is é an cóimheas idir an cóimheas an cóimheas nuair a shroicheann do tháirge luach RF de thart ar 0. 2 ar an bpláta TLC
Is é seo an taithí ar níochán colún a léigh mé go leor leabhar agus roinnte, agus tá an próiseas iarbhír an -chosúil freisin. Go pearsanta, is fearr liom an grádán a laghdú faoi dhó.
Mar shampla, má tá an tuaslagóir le haghaidh dreapadóireachta pláta TLC PE/ea {=2: 1, is dóchúla go dtosóidh an blagaire ar dhíbirt grádáin ó PE/ea {{}}: 1 agus deireadh ag PE/ea {=2: 1, mar thoradh air sin, agus torthaí níos fearr mar thoradh air.
Tá teicnící ann freisin agus iad ag bailiú. Is féidir leat feadán tástála níos mó a roghnú ar dtús chun é a fháil, agus nuair a bhíonn TLC ag druidim leis an spriocphointe, aistrigh go feadán tástála níos lú. Féadann sé seo an fhéidearthacht a laghdú níos mó a fháil agus eisíontais a sheachaint.
Má thagann tú ar chásanna ina bhfuil pointí neamhíonachta agus pointí táirge gar dá chéile, go háirithe iad siúd a bhfuil fluaraiseacht lag acu, cuimhnigh gan brú a chur i bhfeidhm. Ina áit sin, roghnaigh an colún a rith faoi ghnáthbhrú, agus an feadán a athrú gach uair a bhíonn leath nó níos lú feadán ceangailte, rud a fhéadann an dóchúlacht íonú a mhéadú freisin.
Cuimhnigh gan an colún a láimhseáil go tráthúil!
Tá nós ag go leor daoine glacadh leis go bhfuil an colún rite agus triomaithe nuair nach bhfuil aon táirge i bhfeadán amháin nó dhó i ndiaidh TLC sa chéim níos déanaí.
Níor thuig mé ach go raibh an toradh ró -íseal nuair a ríomh mé é, nó nuair a chuaigh mé chun speictream a dhéanamh, chinn mé go raibh an speictream mícheart agus gur chaill mé an pointe mícheart. Bhí aiféala orm go domhain.
Mar sin moltar nach gcuirfidh tú brú ar an gcolún a phróiseáil tar éis duit an pointe inmhianaithe a chomhlánú. Ina áit sin, déan athshondas maighnéadach núicléach chun an toradh a mheaitseáil roimh an bpróiseáil.
Má tá tú gnóthach nó ar deifir chun comhdhúile eile a íonú leis seoCrómatagrafaíocht cholún traidisiúnta, Moltar go n -ídíonn sé le tuaslagóir measctha neamhurchóideacha polaraíocht ard agus an chuid seo den emuent a fhágáil ar leithligh le haghaidh torthaí aitheantais.
Clibeanna Te: Crómatagrafaíocht cholún thraidisiúnta, déantúsóirí Crómatagrafaíochta Traidisiúnta na Síne, Soláthraithe, Monarcha
'Nar par ya
Colún crómatagrafaíochta beagGlaoigh Linn
