Meaisín tástála lártheifeacha
Cur síos
Paraiméadair theicniúla
Meaisín tástála lártheifeachaIs cineál trealaimh tástála é a ghineann luasghéarú láraimsitheach (luasghéarú tairiseach) trí ghluaisne uilleach, a úsáidtear go príomha chun timpeallacht luasghéaraithe ard a ionsamhlú, agus a dhéanann tástáil feidhmíochta agus fíorú iontaofachta táirgí, ábhair nó comhpháirteanna. Is í an phríomhfheidhm atá aige ná timpeallacht luasghéaraithe lártheifeacha rialaithe a sholáthar, a úsáidtear go forleathan in aeraspáis, i ngluaisteán, i leictreonaic, in eolaíocht ábhartha agus i réimsí eile. Gineann sé fórsa lártheifeacha trí uainíocht ardluais, ag ionsamhlú na timpeallachta luasghéaraithe in úsáid iarbhír. Tá méid an fhórsa lártheifigh i gcomhréir le cearnóg gha an uainíochta agus an treoluas uilleach, mar seo a leanas: F=m · ω² · R. Is é F an fórsa Centrifugal, is é m mais an tsampla tástála, is é Ω an velocity uilleach, agus is é an t -airgead atá ag an gcoigeartú. á rialú go beacht chun an timpeallacht mheicniúil a ionsamhlú i gcásanna éagsúla.
Mar chroí -threalamh insamhalta timpeallachta ard -luasghéaraithe, tá ról neamh -inathraithe ag an trealamh i bhforbairt táirgí, i rialú cáilíochta agus i bhfíorú iontaofachta. De réir mar a leanann an teicneolaíocht ar aghaidh, forbróidh sí i dtreo beachtais níos airde, éifeachtúlacht níos airde agus níos mó faisnéise.
Iarratas a dhéanamh ar íonacht samplaí bitheolaíocha a bhrath
Croíphrionsabal na braite íonachta
Lártheifneoiriú grádán dlúis
Prionsabal: Comhpháirteanna difriúla a úsáid i meáin ghrádáin dlúis (mar shiúcrós, clóiríd cesium) difríocht ráta dríodair, foirmiú an chrios srathaithe.
Iarratas: Leithlisiú víreas, próitéine, aigéad núicléasach agus macramóilíní bitheolaíocha eile, ag breithniú an íonachta trí shuíomh an chrios.
Buntáistí: Comhpháirteanna ardtaifigh agus scaradh comhpháirteanna le difríochtaí beaga dlúis.
Lártheifneoiriú difreálach
Prionsabal: Déantar na comhpháirteanna a bhfuil difríochtaí móra acu i méid agus i ndlús a dheighilt de réir a chéile le luasanna difriúla.
Iarratas: Leithlisiú tosaigh na n -orgán (m.sh., mitochondria, núicléas gation), in éineacht le hanailís ina dhiaidh sin chun íonacht a mheas.
Teorainneacha: Réiteach íseal agus eisíontais iarmharacha fhéideartha.
Lártheifneoiriú isodensity
Prionsabal: Aistríonn an chomhpháirt go dtí suíomh an mheáin leis an dlús céanna leis féin sa réimse lártheifeacha, ag cruthú crios cobhsaí.
Iarratas: Víreas agus DNA plasmid a leithlisiú le íonacht ard, agus meastóireacht a dhéanamh ar íonacht de réir leithead agus suíomh an bhanda.
Na príomhtháscairí maidir le braite íonachta
Dáileadh comhpháirte
Sprioc: Ba chóir na comhpháirteanna sprice a chomhchruinniú i gcrios amháin, agus na heisíontais a scaiptear in áiteanna eile.
Modh braite:
Brath optúil: Úsáid a bhaint as ionsú ultraivialait (amhail aigéad núicléasach, próitéin) nó athruithe innéacs athraonta chun monatóireacht a dhéanamh ar an gcrios.
Anailís Leictreafaitiúil: Tar éis na bannaí a bhailiú, déantar an íonacht a fhíorú le leictreafóiréis ghlóthach agarose nó le SDS-PAGE.
Cóimheas an téarnaimh go íonacht
Ráta aisghabhála: an cion den mhéid aisghafa den chomhpháirt sprice leis an méid tosaigh, ag léiriú éifeachtúlacht an idirscartha.
Cóimheas íonachta: An cóimheas dlúis optúil (OD) den chomhpháirt sprice leis an eisíontas. Dá airde an cóimheas íonachta, an purer an sampla.
Cásanna tipiciúla iarratais
Íonú víreas
Próiseas:
Baineadh an lysate cille trí lártheifneoiriú difreálach.
Rinneadh an t -iargúlta a bheith scoite amach le lártheifneoiriú grádán dlúis.
Bailíodh na bannaí víreas agus fíoraíodh an íonacht le micreascópacht leictreon nó le PCR.
Critéir íonachta: cáithníní víreasacha níos mó ná nó cothrom le 95%, iarmhair próitéine cille óstach níos lú ná nó cothrom le 5%.
Íonú próitéine
Próiseas:
Rinneadh an lysate cille a shaibhriú go réamhdhéanta le próitéin trí dheascadh sulfáit amóiniam.
Rinneadh an supernatant a íonú le crómatagrafaíocht mhalartaithe ian in éineacht le lártheifneoiriú.
Fíoraíodh íonacht an phróitéin sprice ag SDS-PAGE.
Caighdeán íonachta: Stráice aonair, gan aon eisíontas.
Íonú aigéid núicléasaigh
Próiseas:
Baineadh próitéin as lysate cille trí eastóscadh feanóil-chloroform.
Rinneadh an supernatant a íonú le deascadh eatánóil in éineacht le lártheifneoiriú.
Bailíodh agus fíoraíodh aigéid núicléasacha ag leictreafóiréis ghlóthach agarose.
Caighdeán íonachta: OD26 0/OD280 Cóimheas 1. 8-2. 0, gan aon éilliú RNA nó próitéine.
Paraiméadair theicniúla agus moltaí optamaithe
Eochairpraiméadar
Speed: High speed centrifugation (10,000-30,000 rpm) is suitable for organelle separation, and ultra-fast centrifugation (>Úsáidtear 30, 000 rpm) le haghaidh íonú víreas agus aigéid núicléasaigh.
Teocht: Cryocentrifugation (-20 Céim C go 4 Céim C) Cuireann sé cosc ar dhíghrádú bithmhéadóilíní.
Cineál rótair: rótar cothrománach do shamplaí móra toirte, rótar uilleach le haghaidh deighilt ardtaifigh.
Straitéis optamaithe
Optamú grádán dlúis: Coigeartaigh an grádán tiúchana de shiúcrós nó clóiríd cesium chun an éifeacht idirscartha a fheabhsú.
Rialú ama lártheifneoireachta: Seachain lártheifneoiriú iomarcach as a dtagann dríodrú comhpháirte nó idirleathadh.
In éineacht le teicnící eile ar nós crómatagrafaíocht ultrafiltration agus cleamhnaithe, cuirtear feabhas breise ar an íonacht.
Réamhchúraimí
Cothromaíocht samplach
Ba chóir an feadán lártheifeacha a chur go siméadrach chun éagothroime rótair a chosc.
Cosc a chur ar thras-éilliú
Bain úsáid as feadáin lártheifeacha indiúscartha chun éilliú idir samplaí a sheachaint.
Cothabháil trealaimh
Luas agus teocht a chalabrú go rialta chun éifeacht idirscartha a chinntiú.
Deireadh
Anmeaisín tástála lártheifeachaIs féidir leis meastóireacht éifeachtach a dhéanamh ar íonacht na samplaí bitheolaíocha trí lártheifneoiriú grádán dlúis, lártheifneoiriú difreálach agus teicneolaíochtaí eile, in éineacht le hanailís braite optúil agus leictreafóiréis. Clúdaíonn a chuid feidhmeanna íonú agus rialú cáilíochta macramóilíní bitheolaíocha amhail víris, próitéiní agus aigéid núicléasacha, agus is uirlis fíor -riachtanach é le haghaidh taighde bithleighis.
Feidhm i bhforbairt drugaí agus i ngéinte teiripe
Iarratas i bhForbairt Drugaí
Foinsí plandaí agus miocróbacha: Úsáidtear teicneolaíocht lártheifeacha chun comhábhair ghníomhacha a bhaint (mar shampla alcalóidigh, polaisiúicrídí, einsímí, etc.) ó phlandaí nádúrtha agus miocrorgánaigh, agus as eisíontais a bhaint trí dheighilt lártheifeacha chun íonacht na gcomhábhar sprice a fheabhsú.
Amhábhair drugaí sintéiseacha: Sa phróiseas sintéise ceimiceacha drugaí, úsáidtear lártheifneoirí chun táirgí imoibriúcháin a dheighilt ó imoibrithe neamhghníomhaithe chun éifeachtúlacht shintéise a bharrfheabhsú.
Meascadh agus scaipeadh:Meaisín tástála lártheifeachaIs féidir amhábhair chógaisíochta a mheascadh go héifeachtach chun dáileadh aonfhoirmeach na gcomhpháirteanna a chinntiú agus dí -mhaolú nó deascadh a sheachaint.
Rialú Méid na gCáithníní: Trí na paraiméadair lártheifeacha a choigeartú, déantar méid agus dáileadh na gcáithníní a rialáil go cruinn chun bithfheabhsú a dhéanamh ar bhith -infhaighteacht agus ar dhíscaoileadh drugaí.
Insamhladh ar choinníollacha comhshaoil: Is féidir le lártheifneoirí timpeallachtaí tromchúiseacha a ionsamhlú mar ardteocht agus taise ard chun díghrádú drugaí a luathú agus a chobhsaíocht a mheas.
Braite Sall Soláthraithe: Deighilt lártheifneoir de tháirgí díghrádaithe agus eisíontais i ndrugaí chun bonn a sholáthar chun caighdeáin cháilíochta a fhorbairt.
Ullmhú nanacháithníní: Úsáidtear teicneolaíocht lártheifneoireachta chun iompróirí drugaí a ullmhú agus a íonú, mar shampla liposomes agus nanacháithníní polaiméire chun méid a gcáithníní agus a n -airíonna dromchla a bharrfheabhsú.
Meastóireacht Dírithe: Déantar iompróirí drugaí neamhcheangailte a dheighilt le lártheifneoiriú chun a n -éifeachtúlacht seachadta spriocdhírithe a mheas.
Teiripe ghéin a chur i bhfeidhm
Íonú iompróra géine
Vectors víreasach: Úsáidtear lártheifneoirí chun veicteoirí géinteiripe a dheighilt agus a íonú mar adenovirus, lentivirus, víreas adeno-adeno (AAV), agus bain na heisíontais ar nós próitéiní cille óstacha agus DNA chun a chinntiú go mbeidh gníomhaíocht ionfhabhtaithe agus sábháilteacht na veicteoirí.
DNA plasmid: Faightear DNA plasmid ard -íonachta trí lártheifneoiriú grádán dlúis nó trí ultracentrifugation le haghaidh aistriú agus léiriú géine.
Eagarthóireacht agus modhnú géine
Córas CRISPR/CAS9: Úsáidtear lártheifneoiriú chun uirlisí eagarthóireachta géine a leithlisiú agus a íonú (m.sh. próitéiní Cas9, GRNAanna) chun a ngníomhaíocht agus a sainiúlacht a chinntiú.
Deighilt núicléach agus mitochondrial: I dtaighde eagarthóireachta géine, úsáidtear lártheifneoirí chun an núicléas agus an mitochondria a dheighilt chun modhnú géiniteach orgánach ar leith a bhaint amach.
Teiripe cille agus taighde gascheall
Leithlisiú agus íonú cille: Trí lártheifneoiriú difreálach agus lártheifneoiriú grádáin dlúis, tá gaschealla, cealla imdhíonachta, etc. scoite amach ó shamplaí fíocháin le haghaidh teiripe cille agus leigheas athghiniúnach.
Aistriú agus Scagadh Cealla: Úsáidtear lártheifneoirí chun cealla a aistríodh a bhailiú agus chun na línte cealla a thug isteach na spriocghéinte a thabhairt isteach go rathúil.
Déan staidéar ar léiriú agus ar fheidhm géine
Leithlisiú Coimpléasc Próitéin: Úsáidtear teicnící lártheifneoireachta chun coimpléisc próitéine a leithlisiú chun staidéar a dhéanamh ar mheicníochtaí rialála géine agus idirghníomhaíochtaí próitéine.
Taighde ar ghéanómaíocht: trí lártheifneoiriú a dhéanamh ar struchtúr cille crómasóim, fo -aonaid crómasóim agus mar sin de, déan anailís ar chomhdhéanamh agus ar fheidhm an ghéanóim.
Paraiméadair theicniúla agus moltaí optamaithe
Eochairpraiméadar
Speed and centrifugal force: high-speed centrifugation (10,000-30,000 rpm) is suitable for the separation of organelles and viruses, and ultra-fast centrifugation (>Úsáidtear 30, 000 rpm) chun macramóilíní bitheolaíocha a dheighilt amhail próitéiní agus aigéid núicléasacha a dheighilt.
Rialú teochta: Coinníonn lártheifneoirí cuisnithe timpeallacht ísealteochta chun díghrádú samplaí bitheolaíocha a chosc le linn lártheifneoiriú.
Straitéis optamaithe
Optamú grádán dlúis: Coigeartaigh an grádán tiúchana de shiúcrós nó clóiríd cesium chun an éifeacht idirscartha a fheabhsú.
Rialú ama lártheifneoireachta: Seachain lártheifneoiriú iomarcach as a dtagann dríodrú comhpháirte nó idirleathadh.
In éineacht le teicnící eile ar nós crómatagrafaíocht ultrafiltration agus cleamhnaithe, cuirtear feabhas breise ar an íonacht.
Cásanna iarratais
Próiseas: Tar éis an veicteoir víreasach (amhail AAV) a shaothrú de réir cille, déantar é a íonú trí lártheifneoiriú ultracentrifugation agus dlúis, agus baintear an próitéin chill óstach agus DNA chun veicteoir ard -íonachta a fháil.
Critéir íonachta: cáithníní víreasacha níos mó ná nó cothrom le 95%, iarmhair próitéine cille óstach níos lú ná nó cothrom le 5%.
Próiseas: Ullmhaítear liposomes nó nanacháithníní polaiméire trí ghalú tuaslagóra nó trí mhodh nana-socraíochta, agus baintear na drugaí agus na heisíontais neamh-chomhshóite trí lártheifneoiriú chun luchtú agus cobhsaíocht drugaí a fheabhsú.
Nós Imeachta: Déantar samplaí fola smeara nó corda a lártheifneáil le grádáin dlúis chun gaschealla hematopoietic a leithlisiú le haghaidh teiripe cille agus leigheas athghiniúnach.
Réamhchúraimí
Cothromaíocht samplach
Ba chóir an feadán lártheifeacha a chur go siméadrach chun éagothroime rótair a chosc.
Cosc a chur ar thras-éilliú
Úsáid feadáin lártheifeacha indiúscartha chun éilliú idir samplaí a sheachaint.
Cothabháil trealaimh
Luas agus teocht a chalabrú go rialta chun éifeacht idirscartha a chinntiú.
Trí pharaiméadair lártheifeacha a rialú go beacht, anmeaisín tástála lártheifeachaSoláthraíonn sé modh éifeachtach agus iontaofa chun idirscaradh agus íonú a dhéanamh le haghaidh forbairt drugaí agus teiripe ghéin, agus cuireann sé nuálaíocht agus forbairt chun cinn i réimse na bithleighis.
Clibeanna Te: Meaisín tástála lártheifeacha, monaróirí meaisín tástála lártheifeacha na Síne, soláthróirí, monarcha
'Nar par ya
Luas meaisín lártheifneoirGlaoigh Linn
B’fhéidir gur mhaith leat freisin
